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阿尔茨海默病大鼠模型构建及药物研发全攻略 ꌥ觉餸分组 实验选用SPF级SD大鼠,健康雄性,体重在250g-300g之间。实验分为六组:正常对照组、模型组、阳性药组和三个不同剂量的受试药组。 젥ꌥ覜 实验周期为4-6周。 建模方法 采用1%戊巴比妥钠40/g腹腔内注射麻醉SD大鼠,麻醉后固定于脑立体定位仪上。根据大鼠脑立体定位图谱,以前囟为零起点,前囟后3.5mm处为穿刺点,中线右侧旁开2mm,用牙科钻钻开颅骨。采用微量注射器自脑表面垂直进针3mm,即(AP= -3.5 mm, ML=2.0 mm, DV=3.0 mm),双侧海马CA1区缓慢匀速注射A-40各10 (1),留针5分钟后退针并缝合伤口。造模后3天,开始尾静脉注射生理盐水,每只大鼠给药100/次/d,连续给药21天后进行水迷宫行为学检测。 行为学检测 所有组别在给药后21天进行Morris水迷宫试验,分为定位航行实验和空间探索实验。 定位航行实验:大鼠连续接受5天训练,每天4次,每次间隔30分钟,记录大鼠从4个入水点和入水并找到平台所需的时间,即逃避潜伏期。4次潜伏期的平均成绩作为当日的最终结果。 空间探索实验:实验第6天,撤去平台,从距离平台最远端入水后将大鼠放入水中,记录30秒内大鼠的游泳轨迹,观察分析大鼠在目标象限的停留时间及穿越平台的次数。 젧𛇧 理学 行为学结束后,将各组大鼠摘取全脑,冰上剥去小脑,将剩余部分左右对切,一半放入4%多聚甲醛中固定,用于病理学检测。另一半取海马用于PCR和蛋白检测。 尼氏染色:海马组织固定后石蜡切片,进行尼氏染色,观察海马区神经细胞形态和数量。光学显微镜下计数视野下每组大鼠同一部位的神经元数量,作统计分析。 免疫荧光染色:观察海马区A-40染色情况。荧光显微镜下计数视野下每组大鼠同一部位的阳性斑块数量,作统计分析。 TUNEL染色:观察神经元凋亡情况。荧学显微镜下计数视野下每组大鼠同一部位的阳性染色数量,作统计分析。 Western-blot检测:收集海马组织蛋白,检测active-caspase-3,Bcl-2和Bax的蛋白表达。 通过以上方法,可以评估阿尔茨海默病大鼠模型的行为学表现和病理学变化,为药物研发提供有力支持。
半分钟完成SD大鼠脊髓损伤模型取材,快来一起学习!「神经科学 」动物疾病模型 #实验室日常威斯腾生物的微博视频
篥 炎模型构建指南 ### 佐剂诱导的大鼠关节炎模型(AIA)튥觉駧类:SD、Wistar 试剂:完全弗氏佐剂(CFA)、液体石蜡 操作步骤:在大鼠的后足或尾根部皮内注射0.1mL的CFA,即可成功构建模型。 特点:SD大鼠的造模成功率略低于Wistar大鼠。在该模型中,T细胞非常活跃,早期会产生大量的炎症因子,如TNF-IL-17、IFN等,而后期则会有大量的IL-4、TGF-퉤。 胶原诱导的大鼠关节炎模型(CIA)튥觉駧类:SD大鼠、Wistar大鼠、Lewis大鼠 试剂:II型胶原、不完全弗氏佐剂(IFA) 操作步骤:将胶原与IFA高速混匀乳化,麻醉后在大鼠的尾根部皮内注射0.4mL的乳化胶原进行初次免疫,一周后再次免疫。二次免疫后的3-7天内即可得到模型。 特点:雌性Lewis模型的稳定性最高,评价化合物药效较为真实可靠,且该模型持续时间可长达50-60天。该模型主要由Th细胞介导。 胶原诱导的小鼠关节炎模型튥觉駧类:DBA/1、B10Q、B10G、NFR/N、C57BL/6 试剂:完全弗氏佐剂(CFA)、II型胶原 操作步骤:将胶原乳化后,在小鼠的尾根部皮内注射。21天后进行二次免疫(也可单次改高剂量胶原诱导)。 注意事项: 小鼠的年龄会影响模型的成功率,7-8周龄的小鼠相对出模率高。 不同品系的小鼠对胶原的敏感度有很大差异,导致成模率不同。例如,DBA/1小鼠对鸡、牛、猪的II型胶原敏感,B10.Rill小鼠对牛、猪II型胶原敏感,而C57BL/6小鼠则只对鸡II型胶原敏感,但本身对胶原不敏感,出模率低。 关节炎指数评价 采用关节炎指数积分来评价关节炎症的程度。除了诱导部位右后足外,根据其余3只未注射的肢体病变程度和趾间是否发炎对每一足爪分别进行打分,以0-4分记录,累积得分即为每只大鼠的关节炎指数。 0分:无红斑和肿胀的证据 1分:红斑和轻度肿胀局限于足中段或踝关节 2分:红斑和轻度肿胀从踝关节蔓延至足中段 3分:红斑和轻度肿胀从踝关节蔓延至关节 4分:红斑和重度肿胀包括了踝、足和趾
穼 解剖实验汇报슰 在本次大鼠解剖实验中,我们深入探索了SD大鼠的生理结构。꠩过精心设计的实验步骤,我们详细了解了SD大鼠的各个器官和系统,包括但不限于消化系统、呼吸系统、循环系统等。슊 实验过程中,我们严格按照科学方法进行操作,确保数据的准确性和可靠性。 通过观察和记录大鼠的解剖结构,我们得出了许多有价值的结论,为后续的科学研究提供了有力的支持。 需要注意的是,本次实验仅供学术交流使用,不可用于商业用途。렦们承诺,所有实验数据和结果仅供学术研究之用,绝不外泄。 再次强调,本次实验汇报的目的是为了分享我们的研究成果,促进学术交流,并无任何商业意图。ᠦ谢大家的关注和支持,期待与您在学术道路上继续探索。
牙周炎动物模型制备方法全解析 牙周炎是一种常见的口腔疾病,研究其发病机制和治疗方法对于人类健康具有重要意义。动物模型在牙周炎研究中扮演着关键角色,下面介绍几种常用的牙周炎动物模型制备方法。 𘀣结扎线法 结扎线法是目前应用最广泛的牙周炎动物模型制备方法。通过在牙龈上结扎缝线,造成牙周组织的机械性损伤,从而诱导牙周炎的发生。 材料选择:结扎材料有尼龙线、细丝线、橡皮圈、正畸用钢丝等,其中正畸不锈钢丝结扎的效果最佳。 操作步骤:选取SD大鼠,用10%水合氯醛麻醉后,用尖头探针将第二磨牙的牙龈分离,用缝线在龈沟内结扎。15天后进行组织学观察,确定建模是否成功。 注意事项:定期检查结扎材料是否脱落,并根据需要进行更换。此方法在结扎时可拨离牙颈处包裹的牙周组织,造成轻微的机械性损伤。 젤高糖黏性食料喂饲联合其他方法 高糖黏性食料喂饲联合其他方法可以更好地模拟临床上糖尿病患者的发病机制。 操作步骤:Wistar大鼠用10%水合氯醛腹腔注射麻醉后,用牙科探针分离第一、二磨牙牙间间隙,采用直径为0.2mm的正畸不锈钢丝结扎大鼠双侧上颌第一磨牙牙颈部。术后从实验当天起喂食糖水,每天高糖饮食喂养(饮用水为10%葡萄糖水,饲料为10%葡萄糖水浸泡变软的常规饲料)。每周检查牙周结扎情况,并观察牙周组织的状况。 三、注射脂多糖(LPS) 通过在下颌第二磨牙牙龈内注射LPS,可以诱导牙周炎的发生。 操作步骤:选取Wistar大鼠,在下颌第二磨牙牙龈内单独注射LPS 10/,并于第3、7、10天分批处死动物,取下颌骨分别进行组织学和免疫细胞化学分析。 模型验证:单独注射LPS在第7天和第10天能够引起典型的牙龈和牙周炎症,表现为渗出液明显增多,结合上皮根方迁移,牙槽间隔的骨丧失,破骨细胞活跃。注射后的第10天,下颌骨的两侧均可见到显著的骨丧失趋势。 通过以上几种方法,可以制备出可靠的牙周炎动物模型,为研究牙周炎的发病机制和治疗方法提供有力支持。
SD大鼠非酒精性脂肪肝模型构建方法 实验动物:成年SD大鼠(200-250g),雌雄各半 造模方法简介:大鼠接受4周高脂饮食,于第3周开始接受每周2次40%四氯化碳豆油溶液皮下注射,通常在周二和周五进行。 模型成功标准: 如图A,与正常对照组比较,模型组大鼠的肝组织中IL-1TNF-上升(p<0.05);模型组大鼠的血清样本中HDL-C的含量显著下降(p<0.05),LDL-C的含量显著上升(p<0.05)。 如图B,取肝组织,做HE染色,模型组肝实质结构受损严重,明显可见空泡性脂肪变性,门管区炎症细胞浸润,且有不同程度出血现象,伴有纤维化。 如图C,取肝组织,做油红O染色,与正常对照组比较,模型组大鼠的肝组织中脂肪明显增多。
酒精肝损伤造模,科研新法! ### 急性酒精性肝损伤模型 造模方法: 选择健康的雄性Wister大鼠或SD大鼠。 用56度白酒灌胃,每次7ml/kg,每日2次,早晚各一次,持续1周。 实验动物自由饮水,普通饲料喂养。 处死动物后,取肝脏进行病理组织学观察。肝脏表现为肝细胞脂肪变性,伴轻度气球样变和炎细胞浸润。 优点: 模型符合人体摄入酒精的方式。 死亡率低,造模时间短。 缺点: 无法估计吸收率。 只能引起血清ALT和AST轻度升高。 适用范围: 酒精性肝损伤急性发病的机制研究。 慢性酒精性肝损伤模型 ieber-Decarli模型 造模方法: 选择健康的雄性Wister大鼠或SD大鼠。 大鼠除喂饲含酒精的液体食料外,不再给其他任何食物或液体,酒精摄入量达每日12~18g/kg。 食料配方含粉末状酪蛋白、玉米油、橄榄油、右旋糖酐、麦芽糖、酒精、维生素、混合盐类、角叉菜胶。 通过这种喂养方式4~12周,可模仿人类慢性饮酒模式,最终可导致大鼠肝脏轻度肝损伤、肝脂肪变性和轻微的肝脏炎症。 优点: 简便易行,费用低,形成率高,稳定性好。 缺点: 肝脏没有出现纤维化。 没有规避动物厌恶酒精的天性。 适用范围: 酒精性肝病的早期阶段病变研究。 Gao-binge模型 𗊊造模方法: 首先给予小鼠5d的液体饮食适应期,然后接受10d的5%-6%酒精液体饲料喂养。 第11天早上给予一个高剂量酒精灌胃,5-6g/kg体重。 优点: 造模方法简便,重复性好。 可模拟人酒精性肝炎的发病过程,血清ALT水平明显升高、肝脏有较严重的脂肪变性和炎症,肝脏中性粒细胞浸润明显,血清中酒精浓度较高。 缺点: 只能表现初期ALD的一些特征,无法重现AH患者严重的炎症病理特征。 适用范围: 急性酒精性肝损伤的机制及ALD药物治疗和靶点的研究。
大鼠2型糖尿病模型构建与鉴定全攻略 大鼠2型糖尿病(T2DM)模型构建: 造模前生理指标检测 튥有SD大鼠过夜禁食(>12小时),隔天进行以下生理指标的检测: 使用电子天平对每只大鼠进行称重,记录基础体重数据。 使用血糖仪测定每只大鼠的空腹血糖(FBG)含量,记录基础血糖值。 构建大鼠T2DM模型 劤詫糖高脂饲料(含67.5%的常规饲料、10%猪油、20%蔗糖和2.5%胆固醇)喂养4周,然后更换成清洁级标准维持鼠料。 将溶解于0.1 mM柠檬酸盐缓冲液(pH=4.2)的链脲佐菌素(STZ)按照20 mg/kg的剂量,左下腹腔注射,每天1次,持续3天。 STZ注射完毕即造模完成(记作0周),待造模1、2、4周后鉴定大鼠T2DM造模稳定情况。 大鼠2型糖尿病(T2DM)模型鉴定 스𝓩水平监测 待所有SD大鼠T2DM模型构建结束后,使用电子天平对每只大鼠进行称重,每周一次记录体重数据。 空腹血糖(FBG)测定 𘊥有SD大鼠T2DM模型构建结束后,使用血糖仪检测造模1、2、4周后大鼠的FBG,即尾尖采血测空腹血糖水平。 口服葡萄糖耐量实验(OGTT) OGTT 实验检测造模1、2、4周后大鼠血糖水平,具体操作如下: 检测前将所有实验大鼠禁食12小时,于OGTT检测当日称重并尾尖采血,测空腹血糖作为0分钟血糖。 然后使用葡萄糖溶液灌胃(2 g/kg),在灌胃后30分钟、60分钟、120分钟测量大鼠血糖并记录。
𞥊觉馨ᥞ制作指南 鼠过敏性哮喘模型制作튩择BALB/c小鼠,在第0天和第14天分别注射OVA液和DBP溶液,第21-23天进行雾化激发。雾化过程中观察小鼠行为,结束后24小时取血、BALF及肺组织。 𘦩𘨯豚鼠咳嗽实验𝓩200-260g的豚鼠置于观察室内,喷入枸橼酸,观察咳嗽潜伏期和次数。合格豚鼠分组后灌胃给药,末次给药后1小时再次引咳,记录数据。 覰小鼠咳嗽实验튉CR小鼠分组后灌胃给药,末次给药后1小时置于烧杯中滴加氨水,观察咳嗽潜伏期和次数。 穼 急性咽炎模型制作𞊦𘅦D大鼠用喉头喷雾器喷氨水,每日两次,连续三天。观察记录大鼠外观和咽部情况。
创伤性脑损伤模型制备指南 튰窠实验准备 动物:8周龄的雄性SD大鼠 仪器:脑立体定位仪、异氟烷呼吸麻醉机、自制管道(长度20-30cm,根据实验需求制作)、20g砝码(可用克氏针代替)、牙科钻、手术刀片、手术刀柄、手术剪刀、眼科镊子(2把)、尺子、棉签、碘伏消毒液、持针器、止血钳、针线(4-0编织线) 砥ꌦ作 麻醉:使用药物进行麻醉 备皮:剃除大鼠头部的毛发 固定:将SD大鼠固定在脑立体定位仪上 消毒:用碘伏消毒大鼠头部 暴露颅骨:在头正中线切开3cm的皮肤,钝性分离软组织、骨外膜,暴露颅骨 剥离骨膜:用牙科钻在冠状缝后、中线旁区域钻一直径5mm的骨窗,保持硬脑膜完整 撞击造模:将20g的砝码从装置上方15~20cm处自由坠落,使其作用于大鼠的硬脑膜,使脑组织产生瞬间形变,致顶叶脑挫裂伤,迅速将装置移开 缝合:缝合伤口 神经功能缺损评分:通过神经功能缺损评分(mNSS)判断造模是否成功。评分标准如下: 正常SD大鼠:0分 轻度损伤:1-6分 中度损伤:7-12分 重度损伤:13-18分 取样:造模后取样 通过以上步骤,你可以成功制备创伤性脑损伤模型,并进行相关的神经功能研究。
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