包埋盒最新娱乐体验_包埋盒的作用(2024年11月深度解析)
免疫组化实验全攻略:从固定到封片 免疫组化实验步骤繁多,但每一步都至关重要。下面我们来详细讲解一下整个实验过程。 一. 固定、脱水、包埋 ꊥ组织:将取出的组织放入4%的多聚甲醛中固定3-4小时,具体时间根据标本大小来调整。 脱水处理:将适当大小的组织放入包埋盒中,进行脱水处理。打开包埋机,用铁饭盒承装石蜡块并放入包埋机组织槽中加热溶解。将脱水后的组织连同包埋盒依次放入组织槽中,然后再放入石蜡饭盒一号进行第二遍浸蜡,接着是石蜡饭盒二号,总共进行三次浸蜡。 包埋过程:选择合适的模具,先调整滴蜡的速度,不宜过快以防气泡。在模具中滴入液体石蜡,然后从饭盒二号中拿出浸后的包埋盒,用镊子取出组织放入模具中。用包埋盒的另一半盖住模具,再滴入少许石蜡后放到冷台上冷却。按上述步骤继续包埋下一个蜡块。 二. 切片、制片 ꊥ片准备:打开切片机,固定蜡块,调整刀片和蜡块的距离。先粗切,看到完整的蜡片并且有组织后切换厚度,调整到想要切的厚度。用力均匀,右手摇动切片,左手用毛笔接片。 制片过程:用毛笔和镊子将片子托起,放入水槽中展片,水温在40度左右。然后用防脱片载玻片轻轻捞起,载玻片的边缘尽量不要触碰水槽底部,防止底部气泡上浮残留在片子上。然后放到烤片机上烤片30分钟。 三. 组织化学染色 芨𑨜ᥒ水化:室温下进行脱蜡和水化处理,具体步骤为二甲苯一号10分钟、二甲苯二号8分钟、二甲苯三号8分钟、无水乙醇5分钟、90%乙醇3分钟、80%乙醇3分钟、70%乙醇3分钟。 抗原修复:换新的切片架,放入水化后的切片。配置抗原修复液,用铁饭盒或者锅加热煮沸,然后将切片放入热锅中15分钟,最后自然冷却室温。 免疫组化笔画圈:取出组织,甩干水分,可用吸水纸吸干水珠。用组化笔画圈围住组织,圆圈完整。 灭活内源酶活性:将切片放入湿盒中,盒中加入少量蒸馏水,滴加3%过氧化氢,室温孵育10分钟。 封闭非特异性位点:甩干水分,吸干水珠,加山羊血清封闭液,放入湿盒内,室温10分钟。 一抗孵育:甩掉封闭液,滴加一抗盖住组织,然后放入湿盒内4摄氏度过夜。 复温:第二天从4度冰箱取出湿盒,室温复温30分钟。 二抗孵育:甩干水分,吸干水珠,滴加二抗一滴或者50微升,室温孵育10分钟。 链霉菌抗生物素孵育:每张片子滴加一滴或者50微升链霉菌抗生物素,室温孵育10分钟。 DAB染色:每张片子滴加两滴或者100微升DAB溶液,显微镜下观察3-10分钟。染色合适即可终止染色,自来水冲洗。 苏木素复染:苏木素复染1-2分钟,细胞核变蓝色即可终止,自来水或PBS冲洗反蓝。 分化:1%盐酸酒精分化3秒,自来水冲洗三分钟。 脱水:70%酒精1分钟、80%酒精1分钟、95%酒精2分钟、无水乙醇4分钟、二甲苯一号3分钟、二甲苯二号3分钟。 封片:凉干片子后滴加适量中性树胶封片,盖上盖玻片,小心气泡。晾干半天即可。 通过以上步骤,你就能完成一次完整的免疫组化实验啦!希望这篇攻略对你有所帮助!
动物组织取材全攻略:从麻醉到固定 动物组织的取材方法非常重要,因为它直接影响到实验结果的准确性。以下是一些详细的步骤和注意事项: 动物麻醉或安乐死𞊩斥 ,动物需要被迅速麻醉或安乐死,以避免长时间处于应激或濒死状态,这样可以减少动物的痛苦,并防止人为干扰产生的假象及病理假象。 固定动物 麻醉或安乐死后,将动物仰卧固定在固定板上,并用酒精擦拭腹部被毛进行消毒。根据取材需求,可能需要进行剃毛或脱毛。 剪开表皮✂️ 沿腹中线剪开动物表皮、皮下肌肉层及腹膜层,并向上剪开胸骨,暴露胸腹腔脏器。 脏器观察 剖开胸腹腔后,先观察动物脏器组织的整体情况,检查有无腹水或肉眼可见的病变。 取出目标脏器 根据实验目的取出目标脏器,并观察有无病变,以及病变部位的形状、色泽、位置、大小及切片等情况。 取材注意事项⚠️ 取脏器组织要快速,可以在湿冰上操作,并尽快将组织转移至固定液中固定。 尽量不使用有齿镊夹取脏器组织,可以使用无齿镊夹住脏器周围结缔组织夹取,避免造成人为损伤。 取材使用的剪刀和刀片要锋利。 肝脏和肾脏等较大组织可以先切成块状,固定后再继续切成合适的大小。 较小的组织如腺体、垂体等在固定前应平贴于滤纸上,使其在固定后保持较好的形态。 脏器上附有血液、粘液等污染物时,用生理盐水冲洗后再进行固定。 消化系统空腔脏器按胃到直肠的顺序排列,沿肠系膜分开后贴于滤纸上再固定,或者有些肠道可以盘成“瑞士卷状”进行固定。 皮肤等扁平容易发生卷曲的组织可以平摊在滤纸上放置于包埋盒中进行固定。 通过这些步骤和注意事项,可以确保动物组织取材的准确性和实验结果的可靠性。
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动物组织冰冻切片全攻略ꊱ. 脱水步骤:将新鲜组织置于20%的蔗糖溶液中,待其沉底后转入30%的蔗糖溶液进行脱水。对于较大的组织,可以再次使用30%的蔗糖溶液进行脱水,确保脱水彻底。 固定与包埋:将组织固定在固定液中48小时。如果需要进行特殊染色,可以直接用液氮速冻组织,然后使用OCT包埋剂进行包埋。 ꠥ片准备:将脱水后的组织用滤纸吸干表面水分,然后在包埋盒中滴入一些包埋剂。将组织切面朝下放入包埋盒,用OCT包埋剂覆盖完全,常温浸润约5分钟。将包埋盒放在冰冻切片的速冻台上速冻,待OCT变白变硬后即可进行切片。如果暂时不切片,可以保存在-20℃。 ✂️ 切片操作:将包埋块固定在切片机上,先进行粗切(25)修切平整后,开始切片,厚度为5-12。将干净的载玻片平放在切出的组织片上方,将组织贴于载玻片上,切片后保存在-20℃或-80℃。
冷冻切片技巧:OCT包埋与速冻全攻略 冷冻切片技术在许多实验中都有应用,但其中有一些关键步骤需要注意,比如蔗糖脱水的时间和浓度,以及速冻的方法。今天我们来聊聊OCT包埋的一些小技巧。 1️⃣ OCT包埋的重要性 OCT包埋在冷冻切片中至关重要,因为它能在一定程度上保证切片的完整性。当你看到OCT开始卷边时,迅速将其粘到载玻片上,这样切片就不会卷走了。 2️⃣ OCT包埋的方法 抏CT包埋的方法有很多种,大家可以根据自己的需求选择: 奶片盒包埋:简单方便,适合大多数情况。 硅胶冰格包埋:尺寸为1.6cm*1.6cm*1.6cm,适合小样本。 自制锡箔纸包埋盒:可以定制尺寸,适合特定需求。 3️⃣ 速冻方法 ❄️ OCT包埋好后,可以采取以下两种方法进行速冻: 液氮速冻:将组织放在包埋盒里,包埋盒写上编号,然后放入玻片盒中,再将玻片盒放入液氮中进行速冻。 -80℃速冻:至少需要30分钟,之后放入-20℃稳定。 通过这些小技巧,你可以更好地掌握冷冻切片技术,确保实验结果的准确性。希望这些信息对你有所帮助!
짟᥈片制作全攻略슰琦掌握石蜡切片的制作过程吗?来,跟着我们的步骤,一步步成为实验高手! 1️⃣ 取材:确保组织新鲜,在死亡后最短时间内取材,避免死后变化。组织块厚度约为10um。 2️⃣ 固定:将组织块浸入固定液中,保持原有结构。一般固定时间为3-4小时。 3️⃣ 脱水:通过一系列浓度梯度的乙醇溶液,减少组织水分,增强石蜡渗透性。 4️⃣ 透明:使用透明剂,使组织更加透明,便于后续的石蜡渗透。 5️⃣ 浸蜡:将组织块浸入石蜡中,使石蜡充分渗透组织。此步骤需在恒温箱中进行,温度约60-65℃。 6️⃣ 包埋:将石蜡倒入包埋盒中,再将浸蜡后的组织块放入其中,进行包埋。 7️⃣ 切片:使用切片机将包埋好的组织块切成薄片,一般为5-10um。 8️⃣ 贴片与染色:将切片贴附在干净的玻璃片上,进行染色处理。染色后,可以在显微镜下观察细胞结构。 完成以上步骤,你就可以成功制作出石蜡切片啦!是不是很有成就感呢?快来试试吧!
짟᥈片制作全攻略✨ 取材后,先进行组织固定、洗涤和脱水处理哦~ 妎姝,在包埋机里,大约60Ⰳ的温度下,我们开始石蜡包埋的神奇之旅! 㩦先,在金属模具上轻轻倒入石蜡,记得要平稳哦~ 진𖥐,把处理好的组织块从一次性包埋盒中取出,平整面朝下放在模具里。 쯸接下来,平移至冷台上,让石蜡自然降温凝固,这个过程需要一点点耐心呢~ ❄️之后,放入包埋盒,再平移回温台上加入石蜡,最后放在冰上凝固,直到可以轻松掰开。 恭喜!你的石蜡切片就完成啦!现在可以常温储存,等待进行石蜡切片啦~ ᥰ贴士:制作过程中要确保工具和手的清洁,避免污染哦! ✨今天也是充实而有趣的一天呢!在实验室的窗户望出去,总有种与世界相连的感觉。你,准备好迎接挑战了吗?ꀀ
第一次在结肠旁脂肪里找淋巴结。师姐施舍我一块巴掌大脂肪[嘻嘻][嘻嘻],这个人的脂肪好多油[晕][晕]之前的那些好像没有这个油,我还没摸脂肪盖包埋盒盖子滑的都要拿不住。先把一大块脂肪“把玩”一边,这个人淋巴结好像不太多没摸到,然后用到书页状切开,一页一页摸,或者用手指在砧板上碾,能碾成糜状的就是脂肪,小结节状的就是淋巴结(手感像小粉刺或者大闭口),再拿剪刀剪下来放在包埋盒里。只依稀摸出两个[悲伤][悲伤]。不像另一个标本的淋巴结有蚕豆那么大
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