移液管图片前沿信息_移液管图片大全(2024年12月实时热点)
짻胞划痕实验全攻略 榉需材料大揭秘抱️⃣ 仪器:细胞计数仪台式离心机、CO2培养箱쯸、倒置显微镜、移液枪、移液管移液器𖣀4℃和-20℃冰箱、6孔培养板飀直尺、marker笔️。 2️⃣ 试剂:细胞适配培养基ꣀFBS㣀PBS胰酶样本溶剂𖣀 实验步骤来啦 1️⃣ 划线:先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀地划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔,每孔至少穿过5条线。 2️⃣ 铺板:将对数生长期的细胞用胰蛋白酶消化成单细胞悬液,接种于6孔培养板,每孔细胞铺板密度为6w/孔,接种原则为过夜后融合率达到100%,每孔最终的培养基总量为2mL。 3️⃣ 细胞培养:将培养板放入37℃、5%CO2的培养箱中培养24小时。 4️⃣ 划痕:第二天用200微升枪头比着6孔板盖子或直尺,平行或垂直于背后的横线划痕,注意枪头要垂直,不能倾斜。 5️⃣ 清洗:用PBS冲洗细胞3次,除去划下的细胞,然后加入无血清培养基。 6️⃣ 拍照:擦去6孔板背后的marker横线划痕,在4倍镜下进行拍照,确保划痕居中且垂直,背景一致。然后加入待测样本,设置浓度梯度,可在0,6,12,24小时时间点取样拍照。 7️⃣ 结果分析:使用Image J软件打开图片,随机划取6至8条水平线,计算细胞间距离的均值或划痕面积均值。 8️⃣ 数据分析:细胞迁移率(伤口愈合率) = (初始划痕面积 - t时刻划痕面积) / 初始划痕面积 或 细胞迁移率(伤口愈合率) = (初始细胞间距离均值 - t时刻细胞间距离均值) / 初始细胞间距离均值。
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