当前位置：网站首页 » 热点 » 内容详情

96孔板最新视觉报道_96孔板每个孔多少ml(2024年11月全程跟踪)

内容来源：好望角图库所属栏目：热点更新日期：2024-11-28

96孔板

CCK-8实验详解，必看！ CCK-8，全称为Cell Counting Kit-8，是一种广泛用于细胞增殖和毒性检测的试剂。它具有高灵敏度、无毒性、操作简便和性能稳定等优点。以下是使用CCK-8进行细胞实验的详细步骤： 𐟔젧𛆨ƒž消化与离心将处于对数期的贴壁细胞用胰酶消化，待细胞大部分脱落时，加入两倍胰酶体积的含血清培养基终止消化。将消化后的细胞转移至离心管，用PBS缓冲液冲洗细胞培养瓶，将残留细胞冲洗下来并转移至离心管。以1000r/min的速度离心3-5分钟，弃去上清液，用1ml含血清培养基重悬细胞。 𐟧𛆨ƒž计数与稀释使用细胞计数仪或牛鲍计数板对细胞悬液进行计数，根据计数结果对细胞进行稀释，推荐浓度为5～10*10^5细胞/ml。 𐟧ꠦŽ姧细胞选择96孔板，设置一个空白对照和7个实验组，每组设置3-5个复孔。每孔加入100ul稀释好的细胞悬液。在边缘孔加入2滴PBS缓冲液或100-200ul培养基，以减少蒸发带来的影响。 𐟕’ 细胞培养与药物处理将接种好的96孔板放入孵箱，培养12-24小时，待细胞贴壁良好后，吸出各孔培养基。空白组加入不含药物的培养基，实验组加入含不同浓度药物的培养基。根据药物作用时间，放入孵箱培养4小时、12小时或24小时。 𐟌ˆ CCK-8孵育与检测药物处理相应时间后，再次吸出各孔培养基，加入含CCK-8的培养基，CCK-8占细胞培养基体积的1/10。放入孵箱培养0.5-4小时，待颜色变为橙色即可检测。注意随时观察颜色变化，不宜时间过长。 𐟓Š 数据处理将96孔板取出，放入酶标仪检测，波长设为450nm。处理分析数据，得出实验结果。通过以上步骤，您可以使用CCK-8进行细胞增殖和毒性检测，希望这些信息对您有所帮助！

MIC测试全攻略𐟔슰Ÿ窠实验准备 Broth 溶液离心管支架细菌移液枪移液枪头 96孔板 𐟔젥ꌦ�ꤊ准备细菌悬液：在37Ⰳ下将大肠杆菌和金黄色葡萄球菌分别培养24小时，培养基为MH琼脂或NA。选取3-5个菌落，使用3ml Broth稀释细菌至0.5 McFarland标准（约1.5㗱0^8 CFU/mL）。可以通过比浊法测定浓度。进一步稀释使细菌最终浓度为5 㗠10^5 CFU/mL。准备测试材料稀释系列：在96孔板上进行两倍稀释。每孔加入100 ⵬ MH Broth，第一列孔中加入100 ⵬母液，然后用移液器将其从第一孔稀释到下一孔（两倍稀释法），直到达到所需的最低浓度。最后弃去最后一孔中剩余的液体，确保每孔100 ⵬溶液。加入细菌悬液：将之前稀释好的细菌悬液按1:1的比例加入每个孔中（例如每孔加入100 ⵬细菌悬液）。此时每个孔中应含有200 ⵬溶液，其中100 ⵬是测试材料的不同稀释浓度，100 ⵬是细菌悬液。对照组设立：阳性对照孔：加入已知有效抗菌剂，如抗生素（可稀释到已知的抑菌浓度）。阴性对照孔：仅加入培养基和细菌悬液，不添加测试材料。空白对照孔：仅加入培养基，无细菌和测试材料。孵育：将96孔板覆盖好后，放入37Ⰳ的培养箱中孵育24小时。结果观察：每个小孔滴入细菌显色液。观察颜色变化。通过以上步骤，你可以测定出最低抑菌浓度（MIC），了解测试材料对细菌的抑制效果。

CCK8实验攻略，轻松掌握！ CCK8实验其实并不复杂，只需掌握一些关键步骤。以下是详细的操作指南： 𐟓ˆ 制作标准曲线计数细胞，按比例用培养基等比稀释成不同细胞浓度梯度，一般需要5-7个梯度，每组4-6个复孔。接种细胞后培养2-4小时，使细胞贴壁。然后每100培养基中加入10 CCK-8试剂（注意不要产生气泡），继续培养1-4小时。用酶标仪测定450nm处的吸光度。 𐟧‰€需培养液可以先转染再种板。在10cm盘中转染，6小时后消化并重悬细胞，调整细胞密度至20000个/ml，种在96孔板中，每孔1000。种板时，用枪头吹吸细胞，彻底重悬并均匀分散。也可以同时进行转染和种板，转染6小时后换液，每孔100新鲜DMEM。 𐟒Š 细胞增殖-毒性检测在96孔板中接种细胞悬液（100/孔，每孔细胞数至少1000），预培养24小时。向培养板加入不同浓度的待测药物。将培养板在培养箱中孵育一段时间后，加入培养基（完全培养基或基础培养基均可），孵育6小时（具体时间根据实验决定），空白孔加入培养基。向每孔加入10的CCK-8溶液（注意不要产生气泡），不用更换培养基。将培养板置于培养箱内孵育1-4小时，用酶标仪测定450nm处的吸光度。 𐟓Š 计算公式细胞存活率=[(As-Ab)/(Ac-Ab)]x100% 抑制率=[(Ac-As)/(Ac-Ab)]x100% As：实验孔吸光度（含细胞、培养基、CCK-8溶液和药物溶液） Ac：对照孔吸光度（含细胞、培养基、CCK-8溶液，不含药物） Ab：空白孔吸光度（含培养基、CCK-8溶液，不含细胞、药物）以上就是CCK8实验的详细操作过程，希望对你有所帮助！

𐟧젃CK-8实验注意事项全解析！ 𐟔젧𛆨ƒž接种量：在96孔板中，贴壁细胞的最小接种量为1000个/孔（100培养基）。对于白细胞，接种量应不低于2500个/孔（100培养基）。若使用24孔板或6孔板，需提前计算每孔的接种量，并按培养基总体积的10%加入CCK-8溶液。 𐟒Š 药物吸收考虑：在细胞毒性实验中，药物的吸收是一个关键因素。可以在加入药物的培养基中加入CCK-8，测定450nm的吸光度作为空白对照。 𐟌᯸ 培养条件：在培养箱中孵育时，培养板最外一圈的孔容易干燥挥发，造成体积不准确，增加误差。建议最外一圈的孔只加PBS，不作为测定孔用。 ⏱️ 培养时间：加入待测物后，培养的具体时间取决于待测物质的性质和细胞的敏感性，如6、12、24、48h。实验时可以选择不同作用时间进行细胞毒性检测。 𐟌€ 培养基更换：如果待检测物质有氧化性或还原性，在加入CCK-8之前应更换新鲜培养基，以去掉待测物质的影响。如果影响较小或没有影响，可以不更换培养基，直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收。 𐟕’ 显色时间：正常显色时间为1-4h，可以每半小时测定一次OD值，使其OD值保持在1-2之间后固定显色时间重复实验。 𐟔„ 延长显色时间：如果显色不够，可以延长培养时间，特别是血液细胞需要较长的显色时间（5-6h）。 𐟓 测定波长：对于高浑浊度的细胞悬液，建议采用双波长进行测定，检测波长450-490nm，参比波长600-650nm，推荐使用650nm。 𐟧Š 保存方法：若暂时不测定OD值，可以在各孔中加入10 0.1 M的HCL溶液或1% w/v SDS溶液，室温避光保存，24h内测定OD值不会发生变化。 𐟓… CCK-8保存：新鲜的CCK-8试剂为粉红色，储存时间过长则颜色加深、效率变低，最好不使用。通常情况下CCK-8试剂在0-5℃避光条件下可保存至少6个月，在-20℃下避光可以保存1年。

睁眼闭眼都在想96孔板杂排心是慌的

跑了五个满满的96孔板，感觉自己二头日渐壮大的同时也要收获腱鞘炎了[猪头][猪头][猪头][猪头][猪头][猪头]

𐟔젅LISA实验必备五大技巧与细节𐟔 一、实验原理𐟓– ELISA实验利用抗原与抗体的特异性结合，通过酶标记放大信号，从而对样本中的目标物进行定量测定。二、抗体与抗原的选择𐟧ꊩ€‰择高特异性、高亲和力的抗体或抗原，以确保实验的准确性和灵敏度。注意抗体或抗原的保存条件和使用方法，避免其失活或变性。三、样本处理𐟧𜊦 𙦍ž验目的和样本类型，选择合适的样本处理方法，如稀释、离心、过滤等。注意避免样本中的干扰物质对实验结果的影响，如非特异性结合物质、酶抑制剂等。四、实验步骤𐟓 包被：选择合适的包被抗原或抗体，按照一定比例稀释后，加入96孔板中，确保每孔均匀覆盖。包被后，将孔板放入孵育箱中，进行一定时间的孵育，使抗原或抗体牢固吸附在孔板上。封闭：使用封闭液封闭孔板中未结合位点，以减少非特异性结合。封闭后，同样需要进行孵育，并确保封闭液均匀覆盖每个孔。加样：准确加入待测样本或标准品，确保每孔加样量一致。注意避免样本或标准品在孔壁上残留，影响结果的准确性。孵育：将加样后的孔板放入孵育箱中，进行一段时间的孵育，使样本中的抗原或抗体与包被的抗体或抗原充分结合。控制孵育时间和温度，避免过长或过短的孵育时间。洗涤：洗涤步骤是去除未结合物质的关键，要确保洗涤充分且不损伤已结合的抗原-抗体复合物。洗涤时要确保每个孔都充分洗涤，避免残留物质干扰结果。加酶标抗体：加入酶标记的抗体，与已结合的抗原或抗体进行特异性结合。同样需要进行孵育和洗涤步骤，确保酶标抗体与抗原或抗体的结合牢固且纯净。显色：加入显色底物，酶标抗体催化底物发生显色反应。控制显色时间和温度，确保显色反应充分且均匀。终止与读数：加入终止液，停止显色反应。准确记录实验过程中的所有数据和观察结果，包括加样量、孵育时间、OD值等。目前商品化的试剂盒一般预先包被了抗体，活化后即可使用；具体步骤及实验条件需按照试剂盒说明书操作。五、实验优化𐟔„ 根据实验结果和需要，可以调整实验条件，如孵育时间、温度、抗体浓度等，以优化实验结果。通过设置不同的对照实验，如阳性对照、阴性对照和空白对照等，来监测实验的准确性和可靠性。

𐟧ꂃA试剂盒蛋白浓度测定实验 𐟔 在进行蛋白研究前，精确测定蛋白浓度至关重要。BCA试剂盒是一种常用的蛋白浓度测定方法。 𐟒᠂CA原理：碱性条件下，蛋白质与Cu2+结合生成络合物，将Cu2+还原为Cu+，BCA试剂与Cu+结合形成紫色络合物，562nm下测定其吸收值，从而计算蛋白浓度。 𐟧𞠂CA配制： 1️⃣ 蛋白标准品配制：溶解25mg蛋白标准品于1mL配制液中，得到25mg/mL的蛋白标准贮备液，再稀释50倍得到0.5mg/mL的工作液。 2️⃣ BCA工作液配制：根据样品数量及重复次数配制，如24个孔需总体积5.1ml，按50:1比例混合A、B试剂。 𐟓Š 蛋白浓度检测：将蛋白标准品按0、1、2、4、8、12、16、20梯度加到96孔板中，补足至20，得到不同浓度梯度。 𐟔堥Š 样孵育：吸取20样品或标准品，加入BCA工作液，37Ⰳ孵育30min后冷却至室温。 𐟓ˆ 测定：用酶标仪测量562nm吸光度，绘制标准曲线，计算样品蛋白浓度。通过这一实验，我们可以准确地了解蛋白样品的浓度，为后续实验提供可靠的数据支持。𐟒ꀀ

MTT细胞增殖实验全流程详解 𐟓š 方法步骤：标记96孔板：取5块96孔板，分别标记d1~d5。将每块板划分为四个区域，分别标记四种病毒名称。每个区域分为三组细胞：CON、NC、KD，每组细胞有5个副孔。准备好血球计数板。细胞准备：将对数期细胞消化后，以4.5 1500 rpm离心3分钟，去掉上清液，用培养基重悬制成细胞悬液。细胞计数：吸取10细胞悬液，沿盖玻片一边缓慢加入，进行细胞计数。铺板：根据细胞生长速度决定铺板密度（多数为2000cell/well），铺板时注意混匀细胞。调整细胞密度：统一铺好后，待细胞完全沉淀下来，在显微镜下观察各实验组的细胞密度。如果密度不均匀，则固定一组，微调其他组细胞的量（如：发现CON组细胞较多，则可再次铺入时，90~60%的量铺板）。再次铺入96孔板中。加入PBS：在孔板周围一圈加入适量PBS，防止培养板中细胞液被烘干。放入细胞培养箱中培养。 MTT实验：细胞贴壁后，取出标记d1的96孔板，每孔加入20 5mg/ml的MTT，轻轻震荡混匀。终止反应：反应4小时后，每孔加入100酸化异丙醇终止反应，震荡混匀。检测OD值：放入培养箱孵育反应至少4小时，用酶标仪595nm检测OD值。 𐟔젥ꌥŽŸ理： MTT实验是一种常用的细胞增殖和细胞毒性的检测方法。通过测定活细胞数量来评估细胞的生长情况。 𐟓Œ 注意事项：所有操作均在无菌条件下进行，确保实验结果的准确性。实验过程中注意细胞密度的均匀性，避免影响实验结果。 𐟓‹ 实验材料： 96孔板血球计数板离心机培养基 MTT溶液酸化异丙醇酶标仪 𐟔젩€š过以上步骤，您可以进行MTT细胞增殖实验，了解不同条件下细胞的生长情况。

为什么实验室宁愿扔掉枪头盒也不重复使用？在实验室里，选择直接购买盒装枪头通常比重复使用更划算，也更省时间。今天做实验时，我算了一笔账：进行两个96孔板的PCR产物纯化需要两个小时，共用了22盒枪头，每盒60个（因为有折扣），总费用为1320元。如果我自己插枪头，就需要提前一天完成，而我的日工资是2000元。再加上散装枪头的原价，导师会花费比直接购买盒装枪头更多的钱，还耽误了一天的工作进度。而且，实验室的技术员做同样的工作，每块板子的费用为1300元，四块板子就是5200元。自己做的工资加耗材费用也要超过5000元。找人做同样可以节省一天时间去做其他事情。因此，通常导师不会让我们自己做PCR产物纯化，而是交给实验室技术员来完成。这样不仅节省时间，还能确保实验的顺利进行。

专栏内容推荐

900 x 675 · jpeg
PCR实验用96孔板-ABI7500PCR实验用96孔板-度元生物科技（上海）有限公司
素材来自:chem17.com
758 x 568 · png
细胞96孔板示意图_word文档免费下载_文档大全
素材来自:1mpi.com

800 x 800 · jpeg
SF-500 微孔板96孔板PCR板ELISA酶标板化学发光板透明封板膜透明封口膜透明板贴100片/包_实验室常用设备_实验室用反应设备_其它 ...
素材来自:chem17.com
500 x 500 · jpeg
PCR实验用96孔板-ABI7500PCR实验用96孔板-度元生物科技（上海）有限公司
素材来自:chem17.com

3648 x 2432 · jpeg
天津本生阐述：96孔板的功能及操作注意事项-技术文章-本生（天津）健康科技有限公司
素材来自:zyzhan.com
3021 x 3024 · jpeg
LabCope 白色96孔板完全匹配罗氏白色96孔板LC-RT-PCR-96-W 50/盒价格_品牌:LabCope -丁香通官网
素材来自:biomart.cn